Diabetologia：激活但功能受到破坏的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次再次出现呼吸道自身血清到再次出现1改型肝炎医学呕吐的困难重重赴援在儿童时期就有很好的描绘，多个呼吸道自身血清非典型的儿童里面有70%在血清转化后10年内患上肝炎，而随访15年的儿童这一百分比减小到84%。相较之下，占医学1改型肝炎一半以上的改型1改型肝炎的患病前提还并未得不到充分的学绝技研究。

愈发多的人开始用于分期系统来定义1改型肝炎的困难重重：形态在再次出现多种呼吸道自身血清时转入第1过渡期，再次出现血糖异常时转入第2过渡期，再次出现呕吐时转入第3过渡期。一些多发呼吸道自身血清非典型的形态，在1期和2期，困难重重较慢，并演进为患病的1改型肝炎。我们之后描绘了一第一组在首次探测到多种呼吸道自身血清结果辨识后数10年无肝炎的较慢困难重重者，这第一组病患数目少，但外观上想像中其明确。随后，我们发现呼吸道自身抗原抗体CD8+T巨噬细胞反应在困难重重想像中快的病患里面理论上不存在，但在近期患病和长期存在的肝炎病患里面很容易探测到。这可能表明，与困难重重病患相较，这些病患自身免疫细胞的可调增强。

一时期学绝技研究表明，尽管可调性T巨噬细胞(Treg)数量正常，但肝炎病患存在一些前提缺陷，其里面包括对IL-2的反应能力减少。此外，肝炎病患里面的不稳定性CD4+T巨噬细胞可能对可调更是具抵抗性，显出为不稳定性T巨噬细胞的减缓增强，自然产生的Treg和体外产生的可借Treg，以及抗原经历的CD4+T巨噬细胞里面IL-2反应增强。本学绝技研究的目地是描绘了CD4+可调性T巨噬细胞(Treg)在一个大想像中想像中快困难重重者里面的外观上，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访小时为18-32年。

方法：BOX学绝技研究是一项以人群基础上的纵向学绝技研究，在21岁以下肺癌的病患亲属里面检测1改型肝炎的危险因素。我们之后描绘了长期想像中快困难重重者的外观上，他们依然多重呼吸道自身血清非典型超过10年，但并未再次出现肝炎的医学呕吐，慢性或非同步进行性自身免疫。随后，10名在此之后依然无肝炎并愿意提供者大量血液结果辨识的想像中快困难重重者纳入T和B巨噬细胞前提归纳。在目前的学绝技研究里面，8名慢困难重重者(SP第一组)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁相互间的呼吸道自身血清非典型。所有的行动者都处于1改型肝炎困难重重的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身血清对某些抗原的过敏原，然而，一名病患已经处于2期数6年，但并未再次出现医学呕吐，一名病患被诊断为肝炎，该受试者72岁，在采集实验结果辨识时，其HbA1c上升到53 mmol/mol(7%)，在统计归纳里面对该NADP同步进行了单独分析。剥离外周血单个核巨噬细胞(PBMCs)，转用多变量流式巨噬细胞绝技和T巨噬细胞减缓试验分析NADP里面Treg的频带、基因改型和前提。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、比如说和回归)同步进行无监督聚类归纳，分析Treg基因改型。

结果：与身心健康NADP相较，来自慢困难重重体的梦境CD4+T巨噬细胞的监督聚类辨识，作用于的梦境CD4+ Treg频带减小，与持续性可借的TNFR相关受体(GITR)理解减小有关。一名HbA1c上升的病患与困难重重想像中快者和冗余的对照第一组相较，Treg谱有所不同。前提归纳表明，与身心健康NADP相较，来自想像中快困难重重体的Treg减缓的CD4+不稳定性T巨噬细胞减缓微小毁坏。显出为对不稳定性CD4+T巨噬细胞CD25和CD134理解的减缓减小。

由此可知1 了解的基因改型归纳辨识，CD4+Treg亚改型在慢困难重重描述符里面减小。由FlowSOM分解成的Treg室，围住在来自所有NADP的活CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标明物理解鉴定出10个元簇:梦境T巨噬细胞_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)用于9个不同Treg标明分解成的10个元簇的MST。每个端口推选一个战略性(100个战略性)，更是大的元战略性(10个元战略性)在端口第一组附近上色。每个端口里面的点心由此可知说明单个标明的理解级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以辨识主体标明理解。(c, d)为HD第一组(c)和SP第一组(d)分解成由此可知，以及FlowSOM标识的每个元簇的覆盖层。(e-l)一般来说数量级为每个metacluster箱本站由此可知(数量级> 0.05%)确定为HD和SP第一组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T巨噬细胞(l)。橙色圆点推选人口为120人SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon一第一组符号秩验证。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 用于CITRUS的预测模改型证明，Treg频带的减小是困难重重想像中快的由此可知案。标准门控(a - f)和柑橘归纳(g-k)比较SP行动者和冗余的HD行动者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的相似之处。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的推选性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3非金属，然后通过HLA-DR和GITR理解同步进行剥离，模拟FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(黑纹)第一组以及NADPSP 606(橙色)里面CD25+ cd127的频带核心内容由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的箱本站由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，箭头突出的簇被标识为SP和HD描述符相互间的不同。(j)箱本站由此可知辨识了在SP(黑纹)和HD(灰点)第一组里面，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的一般来说数量级(百分比)。(k)直方由此可知辨识每个簇的基因改型(粉红色)和Treg标明一般来说理解与背景理解(金色);上列，存储器Treg_3;下面恰巧，存储器Treg_4。背景与所有其他簇里面标明的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon一第一组符号秩验证

由此可知3 与身心健康献血者相较，困难重重想像中快者梦境treg的GITR减小。每个梦境CD4+T巨噬细胞元簇(梦境T巨噬细胞_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个理解标明的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的理解热由此可知(sp606不包括在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(橙色)的FlowSOM GITR理解串联，辨识直方由此可知(c)和核心内容由此可知(d)。Wilcoxon一第一组符号秩和验证，p< 0.07(橙色)所有NADP包括，p< 0.05(金色)NADPSP 606和冗余的HD不包括在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR理解，从标准门控，从所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(橙色)串联，辨识直方由此可知(e)和核心内容由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon一第一组符号秩验证

由此可知4 来自想像中快困难重重的CD4+ treg巨噬细胞支配不稳定性CD4+T巨噬细胞的能力减少。SP第一组用金色的本站和圆点说明，HD第一组用白色的本站和圆点说明，橙色的本站/圆点说明NADPsp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞同步进行分选。CD4+CD25−(应答者)被标明为CFSE, Treg按掩蔽的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸巨噬细胞，人才3天后同步进行流式巨噬细胞绝技探测。(a-d)与CD4+应答者一般来说应的treg人才(诱导)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应答者人才。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE减缓百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的减缓百分比。用于非典型对照(作用于的鼓动巨噬细胞则有treg)数值减缓百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 不稳定性CD4+T巨噬细胞对想像中快困难重重的T巨噬细胞酪氨酸的减缓更是敏感。SP第一组用金色的本站和圆点说明，HD第一组用白色的本站和圆点说明，橙色的本站/圆点说明NADPsp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞同步进行分选。CD4+CD25−(应答者)被cfsel标明，treg按掩蔽的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸巨噬细胞，人才3天后同步进行流式巨噬细胞绝技(CD25反染)和巨噬细胞因子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606应答者共同人才。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE减缓百份(b)。(c,d) CD25减缓百份(c)和CD134减缓百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才里面的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论断：我们得出的论断是，来自想像中快困难重重子的酪氨酸梦境CD4+Treg在GITR理解里面得不到了扩展和丰富，强调了进一步学绝技研究Treg在1改型肝炎风险形态里面的比如说的必要性。

原文说是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28